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一文快速了解探針法PCR檢測試劑盒

更新時間:2021-11-10      點擊次數(shù):420
       關于探針法PCR檢測試劑盒,你的了解有多少呢?小編來帶你了解一下
  本試劑盒采用探針法實時熒光PCR技術,設計一對EB病毒特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光PCR技術對EB病毒的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對病原學輔助診斷。
  1DNA提取
  1)對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50μL核酸提取液),100℃恒溫處理10min,13,000rpm離心5min,取上清液轉移至新的1.5mLEP管,-20℃保存;
  2)DNA的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
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  2.探針法PCR檢測試劑盒檢測方法的局限性
  a.樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;
  b.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結果;
  c.陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導致假陽性結果;
  d.病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;
  f.試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準確的結果;
  g.本檢測結果僅供參考,如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。
  結果判斷
  陽性:檢測通道Ct值≤35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。
  可疑:檢測通道Ct值>35.0,且出現(xiàn)典型擴增曲線的樣本建議重復試驗,重復試驗結果出現(xiàn)Ct值≤35.0和典型擴增曲線者為陽性,否則為陰性。
  陰性:樣本檢測結果無Ct值且無明顯的擴增曲線。

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